Une innovation qui redéfinit les analyses quantitatives
La PCR digitale (Polymerase Chain Reaction digitale) représente une avancée majeure dans le domaine du diagnostic moléculaire, permettant des analyses plus précises, reproductibles et fiables que les techniques PCR traditionnelles.
Comment fonctionne la PCR digitale ?
Contrairement à la PCR classique, qui amplifie un échantillon dans son ensemble, la PCR digitale divise l'échantillon en milliers de réactions indépendantes, chacune ayant une probabilité de contenir zéro ou une molécule cible. Chaque réaction agit comme un test PCR individuel. Après amplification, la présence ou l'absence de la cible est déterminée dans chaque réaction. En combinant les résultats de toutes ces micro-réactions, et à travers l’utilisation de la loi statistique de poisson, il est possible de quantifier de manière précise la quantité de la cible présente dans l'échantillon initial.
La PCR digitale fonctionne en trois étapes clés :
1. Partitionnement de l'échantillon :
L'échantillon est réparti en un grand nombre de micro-réactions chacune réparties dans des compartiments individuels.
2. Amplification :
Chaque compartiment subit une amplification PCR.
3. Analyse :
Le nombre de compartiments contenant la cible est comptabilisé, ce qui permet une quantification d’une précision inédite.
Les avantages de la PCR digitale
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PRÉCISION MAXIMALE
La PCR digitale offre une précision sans précédent, permettant la quantification de faibles quantités d'acide nucléique de manière reproductible.
QUANTIFICATION ABSOLUE
Contrairement à la PCR quantitative traditionnelle, qui repose sur des courbes d'étalonnage, la PCR digitale fournit une quantification absolue sans nécessiter de standardisation.
RÉSULTATS FIABLES
Cette technologie réduit les erreurs dues à la variabilité des échantillons, offrant ainsi des résultats plus fiables, même avec des échantillons complexes ou hétérogènes.
Applications de la PCR digitale
La PCR digitale ouvre un large éventail de possibilités d’application, notamment dans des domaines où la précision et la quantification absolue sont cruciales :
➜ Diagnostic des infections : Détection précoce et quantification des agents pathogènes comme dans le cas des infections virales ou bactériennes.➜ Oncologie : Détection de mutations génétiques spécifiques, analyse des biomarqueurs tumoraux, et surveillance de la rechute dans le suivi des patients cancéreux.➜ Génétique : Quantification des variations génétiques rares ou des mutations ponctuelles, utile pour la recherche en génétique humaine et animale.➜ Biologie environnementale : Surveillance des agents pathogènes dans l'environnement, comme la détection d'ADN d'espèces invasives ou de pathogènes dans les eaux usées ou les sols.➜ Recherche clinique : Études sur l’expression génique, les biomarqueurs et l’identification de nouvelles cibles thérapeutiques.Pourquoi choisir la PCR digitale ?
Pour les laboratoires de recherche, les cliniques diagnostiques et les entreprises de biotechnologie, la PCR digitale représente un véritable atout. Sa capacité à fournir des résultats précis et reproductible même avec des échantillons complexe en fait un choix privilégié dans les applications les plus exigeantes.
En adoptant la PCR digitale, vous bénéficiez de la fiabilité et de la précision nécessaires pour prendre des décisions plus éclairées, qu'il s'agisse de diagnostics cliniques, de recherche fondamentale ou d’applications industrielles.
Application BIOSELLAL
BioSellal se lance aujourd'hui dans l’utilisation de cette technique pour le diagnostic de la paratuberculose, afin d'apporter une précision inédite dans la quantification absolue de Mycobacterium avium paratuberculosis. Cette technique est également proposée pour la quantification des matériaux de référence et des échantillons standards.